Médiateur impliqué dans les phénomènes inflammatoires et allergiques à manifestation immédiate, l’histamine est sécrétée massivement par les mastocytes et polynucléaires basophiles après contact avec un allergène.
Le dosage de l’histamine constitue donc un test pertinent pour l’identification de potentiels allergènes.
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Deux fluorophores partenaires donneur (cryptate d’europium) / accepteur (d2) sont liés respectivement à un anticorps anti-histamine et à l’histamine.
L’histamine de l’échantillon entre en compétition avec l’histamine couplée au fluorophore accepteur, empêchant la liaison de ce dernier avec l’anticorps et donc le transfert d’énergie en temps retardé (TR-FRET) entre les 2 fluorophores.
| TRAITEMENT | |||
|---|---|---|---|
| Format | 96 puits | ||
| Modèle cellulaire | Human Mast Cells-1 | ||
| Stimulation | A23187 / PMA | ||
| Molécule de référence | Quercetol | ||
| Incubation | 18H à 37°C sous 5% CO2 | ||
| Révélation | DOSAGE HTRF | ||
| Format | 384 puits | ||
| Détection | Longueur d’onde d’excitation : 337 nm Longueur d’onde d’émission 1 : 615 nm (émission du fluorophore donneur) Longueur d’onde d’émission 2 : 665 nm (émission du fluorophore accepteur) | ||
Notes :
Recommandation :
