La capacité d’une molécule à traverser la barrière intestinale est une des propriétés étudiées dans le cadre de l’étude ADME-Tox d’un composé.
La lignée cellulaire Caco-2 (dérivée d’un carcinome colorectal humain) est le modèle utilisé in vitro pour l’évaluation de l’absorption d’un composé à travers la paroi intestinale.
Lorsqu’elles sont cultivées sur membranes semi-perméables, les cellules Caco-2 se différencient pour former une barrière épithéliale hautement fonctionnalisée de similarité morphologique et biochimique remarquable avec l’épithélium intestinal.
Les cellules Caco-2 sont cultivées sur une membrane placée entre deux compartiments.
Les composés sont ajoutés du côté apical de la monocouche cellulaire. Leur apparition progressive est mesurée du côté basolatéral. La perméabilité dans cette direction (apical vers basolatéral) représente l’absorption intestinale.
La perméabilité peut également être déterminée dans le sens basolatéral vers apical.
Une perméabilité apical vers basolatéral plus grande qu’une perméabilité basolatéral vers apical est indicatrice d’un transport via un transporteur.
Un transport via la protéine P-gp est suggéré lorsque la perméabilité basolatéral vers apical est plus grande que apical vers basolatéral.
| Format | 24 puits | ||
| Modèle cellulaire | Caco-2 (ATCC HTB-37) différenciées | ||
| Molécules de référence | Antipyrine, Digoxine | ||
| Concentration testée | 10 µM - 3 points | ||
| Incubation | 2H à 37°C sous 5% CO2 | ||
| Analyses | LC-MS/MS (département ADME-Tox) | ||
Notes :
La perméabilité apparente Papp (cm/s) des composés testés est calculée pour les deux sens
(apical vers basolatéral Papp A>B et basolatéral vers apical Papp B>A).
Le ratio d’efflux est déduit d’après la formule : R = Papp B>A / Papp A>B.