Evaluation de l'effet de composés sur l'intégrité de la paroi intestinale

Introduction

L’effet de composés sur l’intégrité de la paroi intestinale peut être évalué en mesurant la variation de la résistance d’une monocouche de cellules Caco-2 après l’ajout du composé.
La lignée cellulaire Caco-2 (dérivée d’un carcinome colorectal humain) est le modèle utilisé in vitro pour la caractérisation des effets de composés sur la paroi intestinale.

Principe

Lorsqu’elles sont cultivées sur membranes semi-perméables, les cellules Caco-2 se différencient pour former une barrière épithéliale hautement fonctionnalisée de similarité morphologique et biochimique remarquable avec l’épithélium intestinal.
Les cellules Caco-2 sont cultivées sur une membrane placée entre deux compartiments.
Les composés sont ajoutés du côté apical de la monocouche cellulaire.
L’effet des composés est évalué par une mesure de la résistance électrique trans-épithéliale de la monocouche cellulaire.

Protocole

Format24 puits  
Modèle cellulaire

Caco-2 (ATCC HTB-37) différenciées

Molécules de référence

IFNɣ + TNFα

Traitement2 concentrations - 3 points
Incubation

72H à 37°C sous 5% CO

Analysesmesure de la résistance cellulaire (TEER) au cours du temps

Notes :

  • Prévoir minimum 20 µL à 10 mM de composés à tester

Evaluation de l’effet d’un anticorps sur l’intégrité de la paroi intestinale