Introduction
Le test cellulaire Label Free, issu de la technologie Corning Epic®, permet de mesurer les changements phénotypiques des cellules entières suite à un stimulus engendrant une redistribution dynamique de masse de la cellule (DMR) .
La redistribution dynamique de masse de la cellule en réponse à un stimulus a lieu dans la majorité des évènements biologiques, et sa mesure peut être réalisée dans le cadre de nombreuses applications, comme la liaison d’un ligand, l’activation ou l’inhibition d’un récepteur, le recrutement intracellulaire, la cytotoxicité, l’infection virale, l’endocytose, le chimiotactisme…
Principe
Les cellules sont ensemencées dans des plaques au fond desquelles sont disposés des biosenseurs optiques.
Le fond de la plaque est éclairé par de la lumière large bande, et la redistribution de masse des cellules suite à un stimulus engendre une modification de l’indice de réfraction de la monocouche cellulaire. Ce changement d’indice est détecté par les biosenseurs, et se traduit par une variation en pm (picomètres) de longueur d’onde de la lumière réfractée.
Protocole
A adapter en fonction de l’essai
| Format | 384 puits | ||
| Modèle cellulaire | cellules adhérentes | ||
| Incubation | ON à 37°C ; 5% CO2 | ||
| Lecture de la ligne de base | |||
| Traitement | conditions à définir | ||
| Lecture de la réponse cellulaire | |||
Notes :
- Quantité de cellules à définir lors de la validation du test
- Prévoir 2 à 3 mg de composés à tester
Recommandation :
- S'assurer de la solubilité de l'échantillon dans un solvant compatible avec la culture cellulaire
Mesure de DMR sur cellules HEK surexprimant le récepteur de l'ocytocine
Tous les modèles peuvent être adaptés à votre demande.