Evaluation des effets cytotoxiques d'un composé sur sphéroïdes uniques

Introduction / Principe

Le test CellTox-Green (PROMEGA) permet de quantifier la viabilité des sphéroïdes au cours du temps dans des conditions de culture classiques sous atmosphère contrôlée grâce à l’utilisation de l’Incucyte S3 (SARTORIUS).

Basée sur le principe de la perméabilité membranaire, la cyanine, molécule fluorescente constituant le kit, colore uniquement l’ADN des cellules non viables.                      
Le signal fluorescent (ex 512 nm / em 532 nm) produit par la cyanine est proportionnel à la cytotoxicité cellulaire.
www.promega.com

Protocole

Format96 puits  - plaque à fond rond
Modèle cellulaire

Tumeurs glioneuronales malignes
possibilité de travailler sur d’autres cellules

Molécule de référenceTerfenadine
Incubation

15 heures à 37°C sous 5% CO
possibilité d’adapter le temps d’incubation au modèle biologique

Tests de viabilitéCellTox-Green (PROMEGA) cinétique et/ou CellTiter-Glo (PROMEGA) 1 point
DétectionIncucyte® S3 (SARTORIUS) - Fluorescence
et/ou mesure de Luminescence

Notes :

  • Prévoir 50 µL à 10 mM ou 3 mg d'échantillon pour tester 5 concentrations (3 points/concentration)

Recommandation :

  • S'assurer de la solubilité de l'échantillon dans un solvant compatible avec la culture cellulaire

 

Tous les modèles peuvent être adaptés à votre demande.