Evaluation du processus d'angiogenèse par des cellules endothéliales

Introduction

L’angiogenèse, processus permettant la génération de nouveaux vaisseaux sanguins dérivés d’une vascularisation existante par les cellules endothéliales, peut être évaluée par la capacité des cellules endothéliales à former des structures tridimensionnelles.

La formation de tubulures par les cellules endothéliales dans une matrice extracellulaire mimant l’environnement in vivo peut être un test pertinent pour identifier facilement des inhibiteurs de l’angiogenèse.

Protocole

Format96 puits  
Modèle cellulaireHuman Microvascular Endothelial Cells-1 (ATCC CRL-3243) 
CoatingMatrigel
Molécule de référenceSuramin
Incubation24H à 37°C sous 5% CO
Analyse

Incucyte® S3 (SARTORIUS) – Logiciel d’imagerie cellulaire
ou ImageXpress Pico (Molecular Devices)
→ Détermination du nombre de tubes
→ Détermination de la longueur des tubes

Notes :

  • Prévoir 50 µL à 10 mM ou 3 mg d'échantillon pour tester 5 concentrations (3 points/concentration)
  • L'inhibition du processus d'angiogenèse est corrélée à la viabilité cellulaire.

Recommandation :

  • S'assurer de la solubilité de l'échantillon dans un solvant compatible avec la culture cellulaire

Inhibition de l'angiogenèse en présence de Suramin